胰蛋白酶是人体胰脏中普遍存在的一种消化水解蛋白酶，它对精氨酸和赖氨酸肽键具有选择性水解作用，在消化过程中起重要作用。塑化剂可通过环境、食物链等途径进入人体，一旦被人类接触或食用，会对人体的消化系统产生影响，可能干扰胰蛋白酶的正常生理功能而影响人体消化功能。

胰蛋白酶(简称胰酶)在贴壁细胞的消化过程中有着非常重要的作用，贴壁细胞在胰酶的作用下脱离培养容器底壁，制备成单细胞悬液，用于细胞的传代、冻存等。细胞培养中使用的胰 酶浓度从0.025%到 0.5%不等，不同细胞对胰酶作用的反应不一样，人们利用这样的特性来分离纯化不同种类的细胞。

传统的差别胰酶消化方法是根据不同表皮细胞对胰酶的敏感性不同,相同浓度的胰酶消化，黑素细胞脱离培养物容器底壁所需的时间比角质形成细胞短，这种方法在表皮细胞的分离和纯化过程中起着非常重要的作用。近年来，随着肿瘤干细胞的提出，各种肿瘤干细胞和肿瘤的生物学特性的关系研究得到人们的关注，并逐渐深入肿瘤干细胞的分离和鉴定的实验探 索。有实验室通过差别胰酶消化这种简单、低成本的方法，收集乳腺肿瘤干细胞，和其他方法相比较具有一定的优势，或者和其他方法相结合，例如荧光活性细胞分选机技术，作为预收集肿瘤干细胞的方法。于是有人提出将差别胰酶消化的方法运用到收集实体肿瘤干细胞中。在本实验中，根据表皮细胞对胰酶的耐受性不同，在较长时间（>4 小时）胰酶消化中和后，黑素细胞恢复贴壁能力更快，短时间内贴壁的均为黑素细胞，这种细胞对胰酶耐受性的不同对早期分离纯化黑素细胞和角质形成细胞有一定意义。日本有学者提出Muse细胞(Multilineage-differentiating stress enduring cells)，一种从间质组织像骨髓、脂肪组织、真皮和器官连接等组织中分离得到，能够从单细胞向三个胚层分化，具有自我更新能力的多潜能细胞。这种细胞起初作为压力耐受细胞（stress-tolerant cells）被识别，将骨髓间质干细胞和成 纤维细胞长时间置于胰酶中或低营养状态，大部分细胞死亡， 仅小部分压力耐受细胞存活，并证实了muse细胞具有干细胞特性,可以作为诱导多潜能干细胞的细胞来源。并有实验通过分离成纤维细胞中的muse细胞，比较了muse细胞和非muse细胞经重编程诱导产生多潜能干细胞的结果，表明了多潜能干细胞诱导产生过程中的精英机制学说。有人报道了通过LTT(long-term trypsin incubation)方法从鼠和人骨骼肌中收集卫星细胞，卫星细胞是骨骼肌干细胞，能使受损的肌肉再生，实 验者通过不同时间的胰酶处理来比较卫星细胞的获得率，发现 胰酶消化3小时左右能最大效率的获得卫星细胞，简单获得卫星细胞的方法对于肌肉再生的研究具有重大意义，而且这种方法对于那些细胞表面标记不是很明确或者收集方法不完善的干细胞来说有着重要的提示作用。在本次实验中，胰酶消化的部分时间段20小时左右)的细胞在培养后呈现细胞团样快速增殖,通过免疫细胞化学染色观察到这些细胞有Nestin、Sox10这两种蛋白表达。Nestin是一种中间丝蛋白，在增殖的神经嵴前体细胞中表达，被认定为一种干细胞标记物，免疫组化证实了黑色素瘤中也有Nestin的表达，而且在黑素瘤细胞中的表达量受Sox10的调控。Sox家族多表达在干细胞或未分化的细胞前体，Cook等人报道了 Sox10 是重要的生黑素转录因子，高表达于黑素细胞前体。表明了长时间胰酶消化后贴壁的细胞具有干细胞或者说细胞前体的 表达特性。这种长时间的胰酶消化作用，是否对活性好、增殖能力强的细胞具有筛选作用，还是这些细胞中含表皮细胞中的muse细胞需进一步探讨。